Jorge Toledo Alonso

Profesor Asociado
Doctor en Ciencias Biológicas, Mención Biología Molecular y Celular. Universidad de la Habana, Cuba

Edificio del Arco, 3er Piso. Departamento de Fisiopatología
(+56-41) 266-1226
(+56-2) 
jotoledo@udec.cl
Laboratorio de Biotecnología y Biofármacos

DOCENCIA DE PREGRADO:

– Docente los Cursos de Fisiopatología, Departamento de Fisiopatología, Facultad de  Ciencias Biológicas, Universidad de Concepción, Chile, periodo 2010-2017:

Asignaturas:
– Ciencias Biomédicas [250406]
– Bioquímica Especial [251501]
– Fisiología y Fisiopatología Humana para Nutrición [254209], Profesor Responsable de  la Asignatura.
– Fisiopatología Humana para Fonoaudiología [254210]
– Fisiopatología para Odontología [254302]
– Fisiología, Fisiopatología y Farmacología para Tecnología Médica [250204]
– Fisiopatología para Enfermería [254202]
– Fisiología para Bioquímica [254301], Profesor Responsable de la Asignatura.
– Fisiopatología para Obstetricia [254203]
– Fisiopatología para Química y Farmacia [254303]
– Bases celulares, moleculares y org. de la sal y enf. II para Kinesiología [254213]
– Tópicos de fisiopatología molecular: cáncer y terapia génica [250401]

– Docente los Cursos Electivos para la Carrera de Bioingeniería, Departamento de Fisiopatología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad de Concepción, Chile, periodo 2010-2015:

Asignaturas:
– Biotecnología Molecular Aplicada [254408], Profesor Responsable de la Asignatura.
– Biología Combinatoria y sus Aplicaciones [254503], Profesor Responsable de la Asignatura.
– Ingeniería de proteínas [250502]

DOCENCIA DE POSTGRADO:

Acreditado como profesor asistente  en los Programas de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad de Concepción:

– DOCTORADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS, ÁREA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR (4235)
– MAGÍSTER EN BIOQUÍMICA Y BIOINFORMÁTICA (4115)
– MAGÍSTER BIOQUÍMICA CLÍNICA (4121)

Líneas de Investigación

Líneas de investigación

  • Caracterización biológica del interferón-ω1 bovino recombinante expresado en la levadura metilotrófica Pichia pastoris.
  • Desarrollo de un sistema de recombinación a sitio-específico, mediado por la recombinasa Cre, para la detección de integración temprana de transgenes.
  • Generación de vectores adenovirales recombinantes para la expresión de proteínas de interés biofarmacéutico en humanos: hormona de crecimiento (hGH), eritropoietina (hEPO) y factor octavo de la cascada de coagulación (hFVIII).
  • Establecimiento de una nueva tecnología para la expresión de proteínas recombinantes en la glándula mamaria, basada en la transducción de vectores adenovirales como transportadores de genes.
  • Expresión y caracterización recombinante de hGH y hEPO en la glándula mamaria de rumiantes genéticamente modificados como bioreactores in vivo.
  • Generación y desarrollo de vacunas veterinarias basadas en candidatos proteico recombinantes: proteína VP60 (virus de la enfermedad hemorrágica del conejo, VP60HRDv), glicoproteína E2 (virus de la peste porcina clásica, E2-CSFv) y glicoproteína hemaglutinina HA (virus de la influenza aviar, HA-IAv).
  • Caracterización del patrón de glicosilación de glicoproteínas recombinantes expresadas en la glándula mamaria.
  • Aplicaciones de la transgénesis mediada por vectores lentivirales en la modificación genética de mamíferos (ratones y rumiantes).
  • Silenciamiento de genes mediante la tecnología de RNA de interferencia combinado a la lenti-transgénesis (Knock-down iRNA).
  • Aplicación de vectores virales en la viroterapia oncolítica.
  • Manipulación y modificación de células madre mamarias con aplicaciones en la generación de biorreactores genéticamente modificados/no transgénicos.
  • Generación de modelos virales para desarrollo de vacunas contra virus Hanta.
  • Evaluación de la relevancia de marcadores moleculares de obesidad en el desarrollo del cáncer de próstata usando el LOX-1 como modelo.
  • Desarrollo de estrategias tecnológicas para la producción de una vacuna recombinante combinada contra el circovirus porcino tipo II.
  • Estudio de la actividad neuroprotectora de la EPOh recombinante de bajo nivel de glicosilación en patologías cerebrales neurodegenerativas e isquemias.
  • Transferencia tecnológica de técnicas de reproducción asistida como herramienta para promover el mejoramiento genético bovino y para potenciar la industria ganadera nacional.
  • Expresión y purificación de proteínas de superficie de Virus Andes mediante vectores adenovirales.

Proyectos

Proyectos dirigidos

FONDEF D09I1262 (2011-2015) “Innovar en la tecnología de proceso para la producción de proteínas recombinantes complejas en la leche de mamíferos no transgénicos. Producción de eritropoyetina humana recombinante para su uso como biofármaco”.

FONDECYT REGULAR 1110925 (2011-2015) “Synthetic replication incompetent Hantavirus-based vectors for development of immunoprophylactic and immunotherapeutic studies in Andes virus”.

FONDEF D010I1282 (2012-2015) “Innovar una plataforma biotecnológica de alto flujo para la generación de nuevas moléculas similares a anticuerpos, a partir de vectores fagémidos. Producción de moléculas anti-VEGF para su empleo como biofármacos de uso terapéutico”.

FONDECYT REGULAR 1121159 (2012-2015) “The Receptor LOX-1 is a Central Regulator of Adhesion and Motility in Human Prostate Cancer”.

FONDEQUIP EQM 120174 (2013-2014) “Equipo para fotodocumentación de animales menores”.

Go to Market 12GTM-17018 (2013-2014) “Novel biotech process to produce complex recombinant proteins in goat’s mammary gland”

FONDEF D11I1188 (2013-2015) “Generación y desarrollo de una vacuna recombinante eficaz contra el circovirus porcino tipo 2 potenciada con citoquinas inmuno-reguladoras: una solución biotecnológica para la porcicultura nacional”.

CORFO 13-IDL2- 18688 (2014-2016) “Desarrollo de un prototipo farmacéutico con actividad neuroprotectora para el tratamiento de accidentes vasculares encefálicos”.

CORFO 17-PDT-73483 (2017-2018) “Programa de Difusión Tecnológica en técnicas de mejoramiento genético como herramientas para potenciar la industria ganadera bovina en la región de Aysén”.

 

Participación en otros proyectos

CORFO 15-VEIID-45768 (2015-2017) “Validación de formulaciones prototipo basadas en péptidos antimicrobianos de Salmo salar para su uso terapéutico y profiláctico en salmónidos”.

CORFO 16-BPER-67028 (2016-2019) Unidad demostrativa como un modelo de extensión y transferencia de conocimiento en técnicas de reproducción asistida de alta efectividad y bajo costo para el mejoramiento genético de la masa ganadera existente en Aysén

CORFO 16-COTE-66345 (2016-2018) “Propuesta de una plataforma tecnológica para la integración compuestos peptídicos en alimentos para salmónidos. Generación de un estado de alerta inmunológica del pez en la etapa de cría y engorda”

 

Publicaciones

  1. Barrera M., Sanchez O., Prieto Y., Castell S., Naranjo P., Rodriguez M.P., Farnós O., Aguilera A., Frias M., Fonseca O., Figueredo J.M., Aguero F., Montesino R., Toledo J.R. (2009) Thermal stress treatment does not affect the stability and protective capacity of goat milk derived E2-marker vaccine formulation against CSFV. Veterinary Immunology and Immunopathology.127: 325-331.
  2. Montesino R., Toledo J.R., Sanchez O., Zamora Y., Barrera M., Royle L., Rudd P.M., Dwek R.A., Harvey D.J., Cremata J.A. (2009). N-Glycosylation Pattern of E2 Glycoprotein from Classical Swine Fever Virus. Proteome Res. 8: 546–555.
  3. Toledo J.R., Prieto Y., Oramas N., Sánchez O. (2009). Polyethylenimine-based transfection method as a simple and effective way to produce recombinant lentiviral vectors. Appl Biochem Biotechnol. 157: 537-554.
  4. Farnós O., Fernández E., Chiong M., Parra F., Joglar M., Méndez L., Rodríguez E., Moya G., Rodríguez D., Lleonart R., González E.M., Alonso A., Alfonso P., Suárez M., Rodríguez M.P., Toledo J.R. (2009). Biochemical and structural characterization of RHDV capsid protein variants produced in Pichia pastoris: advantages for immunization strategies and vaccine implementation. Antiviral Res81:25-36.
  5. Fernández E., Farnós O., Chiong M., Toledo J.R., Parra F., Joglar M., Rodríguez E., Moya G., González E.M., Montero C., Cabezas A., Méndez L., Alfonso P., Rodríguez M.P. (2009). Multidimensional approaches for generation of vaccine candidates against a Cuban isolate of rabbit hemorrhagic disease virus. Vaccimonitor 18:19-21.
  6. Barrera M., Sánchez O., Farnós O., Rodríguez M.P., Domínguez P., Tait H., Frías M., Avila M., Vega E., Toledo J.R. (2010). Early onset and long lasting protection in pigs provided by a classical swine fever E2-vaccine candidate produced in the milk of goats. Vet Immunol Immunopathol.133: 25-32.
  7. Toledo J.R., Barrera M., Farnós O., Gómez S., Rodríguez M.P., Agüero F., Ormazabal V.A., Parra N.C., Suárez L., Sánchez O. (2010). Human αIFN co-formulated with milk derived E2-CSFV protein induce early full protection in vaccinated pigs. Vaccine28:7907-7914.
  8. Castro F.O., Toledo J.R., Sánchez O., Rodríguez Ll. (2010). All roads lead to milk: Transgenic and non-transgenic approaches for expression of recombinant proteins in the mammary gland. Acta Scientiae Veterinariae38: s615-s626.
  9. Ramos O.S., Pose A.G., Gómez-Puerta S., Gomez J.N., Redondo A.V., Benites J.C., Amarán L.S., Parra N.C., Toledo J.R. (2011). Avian CD154 enhances humoral and cellular immune responses induced by an adenovirus vector-based vaccine in chickens. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 34: 259-265.
  10. Ramos OS, Carratalá YP, Puerta SG, Pereira NC, Amarán LS, Chaves SP, Toledo J.R. (2011). Dual promoter lentiviral vector allow generating transgenic mice expressing E2-CSFV glycoprotein in milk, but impair early detection of transgenic embryos. Theriogenology75:1280-1289.
  11. Fernandez E., Toledo J.R., Chiong M., Parra F., Rodríguez E., Montero C., Méndez L., Sánchez O., Farnós O. (2011) Single dose adenovirus vectored vaccine induces a potent and long-lasting immune response against rabbit hemorrhagic disease virus after parenteral or mucosal administration. Veterinary Immunology and Immunopathology142: 179-188.
  12. Rodríguez M., Barrera M., Sánchez O., Rodríguez E.C., Martínez N., Parra N.C., Toledo J.R. (2012) First report of Bovine herpesvirus 5 in bull semen. Archives of Virology. 9:1775-1778.
  13. Tavares K.C., Feltrin C., Carneiro I. S., Morais A.S., Medeiros C.D., Castro F.O., Toledo J.R., Sanchez O., Renard G., Dias A.C., Chies J.M., Santos D.S., Bertolini M., Bertolini L.R. (2012). Adenoviral vector-mediated expression of recombinant human glucocerebrosidase in the mammary gland of rats. Reprod Fertil Dev25: 314-315.
  14. Fernandez E., Toledo J.R., González E.M., Parra F., Zamora J., Barrera M., Martín-Alonso J.M., Montero C., Alfonso P., Estrada M.P., Rodríguez-Mallón A. Farnós O., (2013) Conformational and thermal stability improvements for the large-scale production of yeast-derived rabbit hemorrhagic disease virus-like particles as multipurpose vaccine. PLoS One8: e56417.
  15. González-Chavarría I., Cerro R.P., Parra N.P., Sandoval F.A., Zuñiga F.A., Omazábal V.A., Lamperti L.I., Jiménez S.P., Fernandez E.A., Gutiérrez N.A., Rodriguez F.S., Onate S.A., Sánchez O., Vera J.C., Toledo J.R. (2014) Lectin-Like Oxidized LDL Receptor-1 Is an Enhancer of Tumor Angiogenesis in Human Prostate Cancer Cell. PLoS One9: e106219.
  16. Sánchez O., Barrera M., Farnós O., Parra N.C., Salgado E.R., Saavedra P.A., Meza C.D., Rivas C.I., Cortez-San Martín M., Toledo J.R. (2014) Effectiveness of the E2-Classical Swine Fever Virus Recombinant Vaccine Produced and Formulated within Whey from Genetically Transformed Goats. Clinical Vaccine Immunology21: 1628-1634.
  17. Aguilera V., Briceño L., Contreras H., Lamperti L., Sepúlveda E., Díaz-Perez F., León M., Veas C., Maura R., Toledo J.R., Fernández P., Covarrubias A., Zuñiga F.A., Radojkovic C., Escudero C., Aguayo C. (2014) Endothelium Trans Differentiated from Wharton’s Jelly Mesenchymal Cells Promote Tissue Regeneration: Potential Role of Soluble Pro-Angiogenic Factors. PLoS One. 9:e111025.
  18. Fernández E., Toledo J.R., Mansur M., Sánchez O., Gil D.F., González-González Y., Lamazares E., Fernández Y., Parra F., Farnós O. (2015) Secretion and assembly of calicivirus-like particles in high-cell-density yeast fermentations: strategies based on a recombinant non-specific BPTI-Kunitz-type protease inhibitor. Applied Microbiology and Biotechnology99: 3875-3886.
  19. Salgado ER., Montesino R., Jiménez S.P., González M., Hugues F., Cabezas O.I., Maura-Perez R., Saavedra P.A., Lamazares E., Salas-Burgos A., Vera J.C., Sánchez O, Toledo J.R. (2015) Post-translational modification of a chimeric EPO-Fc hormone is more important than its molecular size in defining its in vivo hematopoietic activity. Biochim Biophys Acta1850:1685-1693.
  20. Muñoz A., Villagrán M., Guzmán P., Solíz C., Gatica M., Aylwin C., Sweet K., Maldonado M., Escobar E., Reyes AM., Toledo J.R., Sánchez O., Oñate S.A., Vera J.C., Rivas C.I. (2015) Cis-regulatory elements involved in species-specific transcriptional regulation of the SVCT1 gene in rat and Human hepatoma cells. Free Radic Biol Med85:183-96
  21. Villagran M.A., Gutierrez-Castro F.A., Pantoja D.F., Alarcon J.C., Fariña M.A., Amigo R.F., Muñoz-Godoy N.A., Pinilla M.G., Peña E.A., Gonzalez-Chavarria I., Toledo J.R., Rivas C.I., Vera J.C., McNerney E.M., Onate S.A. (2015) Bone stroma-derived cells change coregulators recruitment to androgen receptor and decrease cell proliferation in androgen-sensitive and castration-resistant prostate cancer cells. Biochemical Biophysic Research Communication. 467:1039-1045.
  22. Rodriguez Vasquez, F. S., Espinoza, F., Pena, E., Gutierrez, F., Gutierrez, N., Gonzalez, M., & Toledo, J. R. (2016, January). Characterization of the expression and function of LOX-1 (OLR-1) in human glioblastomas. Molecular Biology of the Cell.  27: P291
  23. Camargo, L. S. A., Goncalves, F. S., Pereira, M. M., Siqueira, L. G. B., Toledo, J. R., Parra, N. C., Quintao, C.C.R & Viana, J. H. M. (2016). Pregnancy and birth of calves derived from in vitro-matured oocytes injected with lentiviral vector carrying GFP gene. Transgenic Research 25(1): 118-119.
  24. Veas C., Jara C., Willis N.D., Pérez-Contreras K., Gutierrez N., Toledo J.R., Fernandez P., Radojkovic C., Zuñiga F.A., Escudero C., Aguayo C. (2016) Overexpression of LOXIN Protects Endothelial Progenitor Cells From Apoptosis Induced by Oxidized Low Density Lipoprotein. Journal of Cardiovascular Pharmacology67:326-335
  25. Tavares, K. C. S., de Oliveira Dias, A. C., Lazzarotto, C. R., Neto, S. G., de Sá Carneiro, I., Ongaratto, F. L., Pinto, A.F.M., de Aguilar, L.H., Calderon C.E.M, Toledo, J.R. & Castro, F. O. (2016). Transient expression of functional glucocerebrosidase for treatment of Gaucher’s disease in the goat mammary gland. Molecular biotechnology, 58(1), 47-55.
  26. Beltrán-Ortiz C.E., Starck-Mendez M.F., Fernández Y., Farnós O., González E.E., Rivas C.I., Camacho F., Zuñiga F.A., Toledo J.R. & Sánchez O. (2017) Expression and purification of the surface proteins from Andes Virus. Protein Expression and Purification. 139: 63-70.
  27. Hernández, C. C., Burgos, C. F., Gajardo, A. H., Silva-Grecchi, T., Gavilan, J., Toledo, J. R., & Fuentealba, J. (2017). Neuroprotective effects of erythropoietin on neurodegenerative and ischemic brain diseases: the role of erythropoietin receptor. Neural Regeneration Research, 12(9): 1381.
  28. Castillo, C., Zaror S., Gonzalez M., Hidalgo A., Burgos C.F., Cabezas, O.I., Huges F., Jiménez S.P., González-Horta E., González-Chavarría I., Gavilán, J., Sánchez O, Lopez M.G., Fuentealba J., Toledo J.R. (2018). Neuroprotective effect of a new variant of Epo nonhematopoietic against oxidative stress. Redox Biology, 14: 285-294.

 

Patentes 

Patentes Internacinales

  1. Toledo J.R., Sánchez O., Barrera M., Figueroa N.E., Prieto Y., Rodríguez M.P., Frías M.T., Borroto C.G. CHIMERIC VACCINE ANTIGEN AGAINST CLASSICAL SWINE FEVER VIRUS. Concedida en Europa, Código: EP 19994943 B1- 08 de diciembre de 2010. Concedida en Estados Unidos Código US 8409562 B2 – 02 de abril de 2013.
  2. Toledo J.R., Sánchez O., Rodríguez M.P. y Castro F.O., (2004). A method for the production of recombinant proteins in the mammary gland of non-transgenic mammals. PCT: WO 2004 /034780. [prioridad: 211002].
  3. Sánchez O., Toledo J.R., Díaz D., Figueroa N.E., Rodríguez M.P., Borroto C.G. Chimeric vaccine antigen against the avian influenza virus. PCT: WO2007/09878 A1. [prioridad 010206].

 

Patentes Nacionales

  1. Toledo J.R., González I., Cerro R., Vera J., Zúñiga F., Lamperti L., Ormazabal V., Parra N., Sánchez O., Jiménez S., Oñate S., Rivas C. Moléculas inhibidoras del receptor LOX-1 y su incidencia directa en el control de la progresión tumoral en diversos tipos de cáncer humanos. Solicitud 2014-01709.
  2. Sánchez O., Toledo J.R., González I., Salgado E., Schulz D., Camacho F., Cabezas O., Huges F., González M., Salas A., Montesino R., Saavedra P. Método para la producción de proteínas recombinantes en glándula mamaria de mamíferos no transgénicos. Solicitud: 2014-02410.
  3. Sánchez O., Camacho F., Toledo J.R., Mansilla R., Zapata L., Salas A. Moléculas polipeptídicas contra el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF). Solicitud: 2014-02941.
  4. Parra N., Sánchez O., Toledo J.R., Jiménez S., Camacho F., González I. Secuencia peptídica que reconoce y bloquea de forma específica al receptor de la lipoproteína de baja densidad oxidada (LOX-1). Solicitud: 2015-00616

Laboratorio

Laboratorio de Biotecnología y Biofármacos

Investigador principal: Jorge Roberto Toledo Alonso

Equipo conformado por:

  • Dra. Raquel Montesino
  • Biólogo. Paulina Saavedra
  • Dr. Iván González
  • Dr. Francisco Roa
  • Dr. Alaín González
  • MSc. Emilio Lamazares
  • MSc. Rodrigo Mansilla
  • Veterinario. Rafael Maura
  • Técnico de Procesos. Jessy Barrera
  • Bioquímico. María José Leiva
  • Bioquímico. Nicolás Gutiérrez
  • Dra.(c) Silvana Jiménez
  • Dr.(c) Eddy González
  • Dra.(c) Carolina Castillo
  • Dra.(c) Catherine Meza
  • Dra.(c) Carolina Muñoz
  • MSc. Rita Cerro
  • MSc. Ángela Hidalgo
  • MSc. Yosselyn Vargas
  • MSc. María José Beltrán
  • Bioquímico. Felipe Sandoval
  • Bioquímico. Felipe Espinoza
  • Bioingeniera. Bárbara Benavente
  • Bioingeniera.  Paloma Salvatierra
  • Bioquímica. Paulina Cifuentes
  • Bioingeniera. Camila Saavedra
  • Bioingeniera. Javiera Donoso
  • Bioingeniero. Carlos Araneda
  • Bioquímica. Fernanda Escobar