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Coralia Rivas Roco

Profesora Asistente
Doctor en Ciencias, Universidad Austral de Chile

Edificio del Arco, 3er Piso. Departamento de Fisiopatología
(+56-41) 266-1037
(+56-2) 
corivas@udec.cl
Laboratorio de Antioxidantes

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Líneas de Investigación

Bioquimica Y Biologia Celular De Antioxidantes
El objetivo general del laboratorio es definir los mecanismos celulares y moleculares que determinan la adquisición, acumulación, utilización y reciclaje de la vitamina C en células normales y tumorales. Como herramientas utilizamos modelos animales (ratas y ratones), cultivos primarios de células normales (hepatocitos de rata, células endoteliales de vena umbilical y de amígdalas humana, eritrocitos y neutrófilos humanos) y tumorales (próstata, mama y leucemia), líneas celulares inmortalizadas (célulals endoteliales de microvasculatura cerebral humana y de rata, astrocitos humanos, células renales humanas, de mono, perro y zarigueya, células de cáncer de colon, leucemia, mama y próstata), cDNAs codificando para los diferentes transportadores y reductasas de vitamina C, y quimeras transportadores-GFP. Desarrollamos un proyecto multidisciplinario en las siguientes áreas:
1. Adquisición dietaria de vitamina C y transporte a través de barreras biológicas. Expresión, función y compartimentalización polarizada de transportadores de vitamina C reducida (SVCTs) y oxidada (GLUTs) en barreras intestinal, renal, hematoencefálica y sangre líquido cefalorraquídeo. Utilizamos ensayos de transporte e inhibición, PCR convencional y cuantitativo, e inmunocitoquímica con microscopía convencional y confocal. 2. Acumulación intracelular, reciclaje y recuperación de vitamina C. Complementación funcional entre los transportadores de vitamina C de membrana plasmática e intracelulares, reductasas de vitamina C, glutatión, especies reactivas del oxígeno e interacciones célula-célula. Definición de los mecanismos que determinan los bajos requerimientos diarios de vitamina C de los seres humanos, una especie incapaz de sintetizar vitamina C. 3. Función de la vitamina C y el par vitamina C-glutatión en defensa a estrés oxidativo. Papel de la vitamina C como antioxidante en presencia de un exceso de glutatión intracelular, y de que modo un aumento de vitamina C se relaciona con un aumento de la resistencia celular al estrés oxidatvo. Utilizamos ensayos de muerte celular (necrosis y apoptosis) incluyendo detección por citometría de flujo en células modificadas farmacologicamente conteniendo niveles predeterminados de vitamina C y glutatión. Efecto de estrés oxidativo sobre la expresión y función de los transportadores y reductasas de vitamina C. 4. Diferenciación celular y regulación de la expresión y compartimentalización subcelular de transportadores de vitamina C. Función de transportadores de vitamina C intracelulares translocados en respuesta a estímulos fisiológicos y fisiopatológicos, y efecto de estrés oxidativo y diferenciación celular. Clonanmiento de transportadores intracelulares y uso de células transfectadas con quimeras transportador-GFP. 5. Mecanismo molecular de transporte de vitamina C. Identificación y clonamiento de nuevos transportadores e isoformas activas e inactivas, y sobreexpresión en células con vectores plasmidiales y virales. Caracterización funcional y análisis molecular del mecanismo de transporte. 6. Determinantes estructurales de los transportadores de vitamina C. Identificación de motivos estructurales importantes en los transportadores de vitamina C, utilizando mutagénesis sitio-dirigida, quimeras, predicción de estructura 3D, identificación de sitios de unión por docking utilizando bibliotecas de compuestos químicos naturales y sintéticos, experimentos de inhibición y competencia. Identificación de nuevas moléculas que interactuan con los transportadores de vitamina C y modulan su función para uso farmacológico.

Proyectos

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Publicaciones

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Laboratorio

La Dra. Rivas es Investigadora Principal del Laboratorio de Antioxidantes.